В 1749 г., при царствовании Елизаветы Петровны в связи со сложившейся ситуацией на юге государства Российского, возникла потребность наличия таможни в Приазовском крае, после чего по указу императрицы, на берегу Темерник-реки, недалеко от руин Темерницкое городища возвели таможню. Потому как это был единственный таможенный пункт на юге, спустя 10 лет Темерницкая таможня очень быстро разрослась, при ней уже были казармы и пристань с необходимыми постройками. Потому как Темерницкая таможня очень долго была единственным речным и морским портом на юге России, таможня могла вести прямую торговлю морем с другими государствами.

Потому как крепость Дмитрия Ростовского была стратегически важной, на вооружение Ростовской крепости было выделено более 200 единиц артиллерии и большой военный гарнизон, после этого хорошо защищённая крепость, во время войны с Османской империей, приобрела роль армейской базы в тылу. В 1783-1784 г-Х В Ростовской крепости был комендантом сам А. В. Суворов. Именно в Ростовской крепости славный путь флотоводец Ф. Ф Ушаков.

Город Ростов часто своим названием вызывал путаницу с Ростовом Ярославским, во избежание неприятных конфузов с названиями городов к Донскому Ростову было добавлено уточнение "На Дону", в 1811 г. город Ростов-на-Дону приобрел собственный герб и в XIX веке Казачий Ростов относился к Екатеринославской губернии.

XIX век был временем расцвета Ростова-на-Дону как города, угроза со стороны Османов была устранена, и город, благодаря своему географическому расположению и наличию порта на р. Дон, развивался как торговый город, потому как порт позволял вести торговлю не только с соседними городами но и с другими государствами.

В Ростове-на-Дону устраивались крупнейшие в России ярмарки, тут торговали хлебом и сахаром, солью, рыбой и каменным углем. Потому как предпочтение было отдано именно торговле городская промышленность до средины XIX века особо не имела развития, но ситуация со временем менялась, со середины XIX века в Ростове построились крупные водочный и пивоваренный заводы, появилось предприятие по литью чугун, к 1850 г. в Ростове было уже более 50 разных заводов и фабрик, соответственно, уверенно прибавлялось количество жителей в Ростове-на-Дону, пусть город и считался уездным но судоходная река Дон с портом, железная дорога со станцией и наличие рабочих мест на заводах и фабриках способствовало постоянному прибавлению жителей. В 1860 г. в Ростове насчитывалось около 17,5 тыс. жителей, а через 20 лет население города приближалось к 100 тыс. человек.

К концу XIX века, в 1887 г. город Ростов-на-Дону стал центром Ростовского казачьего округа, Донского казачьего войска.